構樹生根培養基的篩選對比

  以1/2 MS+0.8%瓊脂+3%蔗糖為基礎培養基，加入不同質量濃度的6-BA和NAA。采用6-BA采用0.5,1.0,1,5mg/L等3個水平。NAA采用0.2,0.3,0.4,0,5 mg/L等4個水平。每瓶接種1~2個幼苗，每個水平接種15瓶，培養15 天后觀察并記錄構樹健壯幼苗的生根情況。

  構樹的馴化移栽

  將長有構樹幼苗的培養瓶轉移至半遮陰的自然光下，2~3天后開口煉苗。將營養缽中裝入蛭石和珍珠巖，洗干凈幼苗根部黏附的培養基后，將幼苗移入營養缽中并澆足水。用塑料薄膜為幼苗搭建小拱棚并噴霧保濕，同時注意通風，隨后逐漸降低濕度，15 天后揭去棚膜，讓幼苗在自然條件下生長。

  結果與分析

  消毒劑及消毒方法的比較

  滅菌效果很好的處理是75%乙醇溶液浸泡30 秒后，再用0.5%HgCl2滅菌15 分鐘 ，除菌率可以達到68.2%，外植體的成活率可達43.6%。

  愈傷組織及芽苗的培養基對比

  構樹葉片在愈傷組織誘導培養基中培養20天后，觀察不同濃度激素比例下葉片的增殖倍數與芽苗高度等生長狀況。由實驗結果可知，對愈傷組織的影響較大的激素為6-BA，當20天質量濃度逐漸增大時，芽的增殖倍數逐漸變大;當6-BA質量濃度為1.5 mg/L，NAA質量濃度為1.0mg/L時，增殖倍數為5.4，愈傷組織分化效果最明顯。

  因此，誘導愈傷組織分化的很佳培養基配方為MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.8%瓊瓊脂+3%蔗糖。

  構樹壯苗培養基的篩選

  從試驗得知對壯苗影響較大的激素為6-BA，當6-BA質量濃度為1.5mg/L，NAA質量濃度為0.2 mg/L時，壯苗效果最明顯，此時株高為3.6 cm。

  由此可得壯苗效果很佳的培養基配方為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.8%瓊脂+3%蔗糖。

  生根培養基的篩選

  接種至生根培養基12 天后可以看到根原基分化出的愈傷組織，15天后可看到誘導出的細小不定根。從試驗看出，當6-BA質量濃度為0.5mg/L，NAA質量濃度為1.0 mg/L時，根的生長情況很好，此時根原基的發生率為93%。

  由此得出很佳的生根培養基為1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.8%瓊脂+3%蔗糖。

  構樹幼苗的馴化移栽

  從試驗對比得知，構樹幼苗在移栽到蛭石中的成活率高于珍珠巖。在珍珠巖中，葉片失水嚴重，苗木萎蔫，生長不良;而蛭石中的幼苗則生長良好，移栽25 天后，長高3~5cm，葉片明顯變大且長出1~2條新根，原來的根伸,1~2 cm。

  試驗結論

  無菌材料是植物組培快繁的前提，對葉片進行消毒時，時間過長可能會對材料造成毒害，影響葉片的生命活力;時間過短可能會造成消毒不徹底。

  由試驗得出：很佳滅菌方法為0.5% HgCl2的處理15分鐘，在考慮選擇何種滅菌劑的同時，還綜合考慮了滅菌時間對滅菌效果的影響。但也有研究認為，構樹葉片外植體很佳消毒方法是0.1% 的HgCl2(加吐溫80和0.5%次氯酸鈉的二次滅菌法，這可能是由于試驗材料的來源不同及其生長環境的差異，導致材料所帶的微生物不同，從而需要滅菌的強度也有所差異。

  在組織培養中，生長素類物質的主要作用是促進新梢生長，誘導外植體產生愈傷組織及促進培養組織的延伸生長;細胞分裂素類物質的主要作用是促進細胞的分裂和分化，誘導胚狀體和不定芽的形成。在離體條件下，器官的誘導并不是由某種生長激素的濃度所決定，而是由那些參與分化的物質間的比例關系所決定，當6-BA與NAA的比例低時有利于愈傷組織的形成和芽的生長;比例高時有利于芽的分化。

  試驗研究結果表明，誘導愈傷組織分化時6-BA與NAA的適宜比例為3:2;壯苗時6-BA與NAA的適宜比例15:2;生根時6-BA與NAA的適宜比例為1:2。